ELISA試劑盒檢測方法的局限性：
① 樣本檢測結(jié)果不樣本收集、處理、運送以及保存質(zhì)量有關(guān)；
②樣本提取過程中沒有控制好交叉污染，會出現(xiàn)假陽性結(jié)果；
③陽性對照、擴增產(chǎn)物泄漏，會導(dǎo)致假陽性結(jié)果；
④病原體在流行過程中基因突變、重組，會導(dǎo)致假陰性結(jié)果；
⑤不同的提取方法存在提取效率差異，會導(dǎo)致假陰性結(jié)果；
⑥試劑運輸，保存不當(dāng)或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降，出現(xiàn)假陰性或定量檢測不準確的結(jié)果
樣本采集、存放及運輸：
1、費用樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（zui多凍融3次）；
3、運輸：采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
ELISA試劑盒做標準曲線樣品檢測時有幾個問題需要注意
1、樣品的濃度等指標是根據(jù)標準曲線計算出來的，所以首先要把做標準曲線看作是比做正式實驗還要重要的一件事，否則后面的實驗結(jié)果無從談起。
2、設(shè)置標準曲線樣品的標準濃度范圍要有一個比較大的跨度，并且要能涵蓋你所要檢測實驗樣品的濃度，即樣品的濃度要在標準曲線濃度范圍之內(nèi)，包括上限和下限。而對于呈S型的標準曲線，盡量要使實驗樣品的濃度在中間坡度zui陡段，即曲線幾乎成直線的范圍內(nèi)。
3、采用倍比稀釋法配制標準曲線中的標準樣品濃度，這樣就能夠保證標準樣品的濃度不會出現(xiàn)較大的偏離。
4、檢測標準樣品時，應(yīng)按濃度遞增順序進行，以減少高濃度對低濃度的影響，提高準確性。
5、標準曲線的樣品數(shù)一般為7個點，但至少要保證有5個點。
6、做出的標準曲線相關(guān)系數(shù)因?qū)嶒炓蟛煌兴儎樱话銇碚f，相關(guān)系數(shù)R至少要大于0.98，對于有些實驗，至少要0.99甚至是0.999.
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