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      人CXC趨化因子配體16洗滌方法
      更新時間:2021-10-28   點擊次數(shù):792次

      人CXC趨化因子配體16洗滌方法:

      1. 自動洗板機:每孔加入洗滌液350μl,注入與吸出間隔60秒。洗板5次。

      2. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,在潔凈的吸水紙上拍干,每孔加洗滌液350μl,浸泡1-2分鐘,吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體,在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。

      實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫;試劑或樣品配制時,均需充分混勻,并盡量避免起泡。

      1.加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣時將樣品加于酶標(biāo)板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。給酶標(biāo)板覆膜,37℃孵育2小時。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

      2.棄去液體,甩干,每個孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜,37℃溫育1小時。

      3.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分鐘,大約350μl /每孔,甩干并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干。

      4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內(nèi)配制)100μl,加上覆膜,37℃溫育1小時。

      5.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,方法同步驟3。

      6.每孔加底物溶液100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實際顯色情況酌情縮短或延長,但不可超過30分鐘。當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔出現(xiàn)明顯梯度時,即可終止)。

      7.每孔加終止液50μl,終止反應(yīng),此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。

      8.立即用酶標(biāo)儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值)。應(yīng)提前打開酶標(biāo)儀電源,預(yù)熱儀器,設(shè)置好檢測程序。

      9.實驗完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結(jié)束。

      錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白33B抗體

      載脂蛋白C3抗體

      細胞凋亡增強核酸酶抗體

      染色體脆弱性相關(guān)基因抗體

      磷酸化蛋白激酶B抗體

      銅轉(zhuǎn)運蛋白質(zhì)β鏈抗體

      酰基輔酶A合成酶家族4抗體

      酸性磷酸酶樣蛋白2抗體

      AHNAK核蛋白2抗體

      二磷酸腺苷核糖基化因子6相互作用蛋白抗體

      p53誘導(dǎo)蛋白5抗體

      錨蛋白重復(fù)域5抗體

      腦鈉通道蛋白2抗體

      腦鈉通道蛋白4抗體

      小腸鈉通道蛋白5抗體

      APXL蛋白抗體

      酸敏感離子通道蛋白3抗體

      天門冬氨酸β羥化酶抗體

      精氨酸加壓素受體2抗體

      細胞骨架肌動蛋白樣蛋白3抗體

      膜粘連蛋白8抗體

      水通道蛋白8抗體

      錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白40抗體

      凋亡抑制因子5抗體

      水通道蛋白-3抗體

      載脂蛋白D抗體

      丁酰基輔酶A合成酶3抗體

      脂肪細胞源性亮氨酸氨基肽酶抗體

      線粒體凋亡誘導(dǎo)因子2抗體

      ABL2蛋白抗體


       

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