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      改良熒光探針pcr試劑盒準(zhǔn)備試劑與收集血樣
      更新時(shí)間:2022-07-05   點(diǎn)擊次數(shù):839次

      改良熒光探針pcr試劑盒準(zhǔn)備試劑與收集血樣:

      雙重核酸試劑盒(熒光PCR法) 1.  收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測, 2-8 ℃ 保存48 小時(shí);更長時(shí)間須冷凍( -20   ℃或 -70   ℃ )保存,避免反復(fù)凍融。

      2.  標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 管 8 管,管加標(biāo)本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。

      3.  10× 標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋( 示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。

      4.  洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋(示例:1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)

      檢測程序:

      1.  加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品 100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

      2.  洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向?yàn)V紙上印干。

      3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

      4.  洗板:同前。

      5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

      6.  洗板:同前。

      7.  每孔加入底物工作液100ul ,置 37   ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。

      8.  每孔加入100ul 終止液混勻。

      9.  30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在 45 0 nm 處測 吸光值。

      性能:

      1. 準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。

      2. 靈敏度:檢測濃度小于0.1 U/mL。

      3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

      4. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。

      5. 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。

      6. 有效期:6個(gè)月

      營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基

      亞碲酸鉀(慶大霉素瓊脂凍干配套試劑)

      亞碲酸鉀(四號(hào)瓊脂凍干配套試劑)

      3%氯化鈉三糖鐵瓊脂

      Cary-Blair氏運(yùn)送培養(yǎng)基(不含瓊脂)

      Cary-Blair氏運(yùn)送培養(yǎng)基

      60g/L氯化鈉蛋白胨水(PW)

      慶大霉素瓊脂

      3%氯化鈉溶液

      我妻氏血瓊脂

      3%氯化鈉胰蛋白胨大豆瓊脂

      堿性瓊脂

      四號(hào)瓊脂

      TCBS瓊脂

      緩沖-甘油氯化鈉溶液

      3%氯化鈉堿性蛋白胨水

      堿性蛋白胨水

      SCDLP液體培養(yǎng)基

      營養(yǎng)瓊脂(普通肉湯瓊脂培養(yǎng)基)

      含鐵牛奶培養(yǎng)基


       

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