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      人腦紅蛋白操作步驟與注意事項(xiàng)
      更新時(shí)間:2015-11-06   點(diǎn)擊次數(shù):2121次

      人腦紅蛋白操作步驟:

      1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支

      2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、

      待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,

      然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5 倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡

      量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

      3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。

      4. 配液:將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用

      5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30 秒后棄去,如此

      重復(fù)5 次,拍干。

      6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

      7. 溫育:操作同3。

      8. 洗滌:操作同5。

      9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色

      15 分鐘.

      10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

      11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止

      液后15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

      人腦紅蛋白注意事項(xiàng):

      1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未

      用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

      2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

      3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間

      控制在5 分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。

      4. 請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD 值

      大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定,計(jì)

      算時(shí)請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

      5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

      6.底物請避光保存。

      7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

      8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

      9.本試劑不同批號組分不得混用。

      10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。標(biāo)準(zhǔn)品

       

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