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      人活化蛋白C(APC)酶聯(lián)免疫分析試劑盒 說明書

      簡要描述:

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      更新時間:2024-08-30;廠商性質:經銷商;覽量:1303

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      產品名稱:人活化蛋白C(APC)酶聯(lián)免疫分析試劑盒 說明書
      英文名稱:Human activated protein C (APC) ELISA Kit
      產品規(guī)格:96T/48T(兩種規(guī)格)
      檢測方法:酶免法/酶聯(lián)免疫法(ELISA)
      保存條件:2-8
      產品性狀:液體盒裝
      產品價格:含稅含運費,我們全程提供ELISA實驗技術指導和ELISA試劑盒免費代測。
      人活化蛋白C(APC)酶聯(lián)免疫分析試劑盒 說明書技術交流:

      雙抗體夾心法(檢測未知抗原)

      間接法(檢測未知抗體)

      1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應孔中加0.1ml4 過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
      2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37 孵育1小時。然后洗滌(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)
      3、加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.05ml37 孵育0.51小時,洗滌。
      4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml37 1030分鐘。
      5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
      6
      、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。

      1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1-10ug/ml 每孔加0.1ml4過夜。次日洗滌3次。
      2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應孔中,37孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)
      3
      、加酶標抗體:于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.05ml37孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
      4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml37 1030分鐘。
      5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
      6
      、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。

      人活化蛋白C(APC)酶聯(lián)免疫分析試劑盒 說明書操作步驟:
      1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在*、第二孔中分別加標準品100μl,然后在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。
      2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
      3. 溫育:用封板膜封板后置37溫育30分鐘。
      4. 配液:將3048T20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水3048T20倍)倍稀釋后備用。
      5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。 6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
      7. 溫育:操作同3
      8. 洗滌:操作同5
      9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37避光顯色15分鐘.
      10.
      終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
      11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
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      PROCR Others Cynomolgus 食蟹猴 Epcr / PROCR 人細胞裂解液 (陽性對照)

      羅猴胎腎細胞;MA104

      CL-0229T84(人結腸腺癌肺轉移細胞)5×106cells/瓶×2

      SH-77細胞,小細胞肺癌 T細胞白血病細胞,T-CEM細胞 T淋巴瘤轉基因細胞;Jurkat D,E

      A-375(人惡性黑色素瘤細胞) 5×106cells/瓶×2

      BACE1 Others Human BACE1 / ASP2 人細胞裂解液 (陽性對照)
      恒河猴腎細胞;MMK2

      MM, 小鼠小膠質細胞

      IFNA13 Others Mouse 小鼠 IFNA13 / Interferon alpha-13 人細胞裂解液 (陽性對照)

      MDA-MB-157細胞,癌細胞 人胎盤絨膜癌細胞,BeWo細胞 人肺動脈內皮細胞RNAHPASMC miRNA5 μg

      人肺巨細胞癌低轉移細胞株;PG-LH7

      EPHB6 Others Human EphB6 / EPHB6 人細胞裂解液 (陽性對照)
      人活化蛋白C(APC)酶聯(lián)免疫分析試劑盒 說明書羅猴胎腎細胞;MA104

      CALCB Others Human CALCB / CGPR / Calcitonin 2 人細胞裂解液 (陽性對照)

      小梁網細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

      MCF7B細胞,人癌細胞 人癌Tamoxifen耐藥株,LCC2細胞 脂肪細胞生長添加物PAGS

      水牛皮膚成纖維樣細胞;WB-S4

      IL1RL1 Others Human IL1RL1 / DER4 人細胞裂解液 (陽性對照)

      溫馨提示:使用前,請*閱讀說明書。本酶聯(lián)免疫試劑盒是基于經典酶聯(lián)夾心技術原理,只能用于研究用途,不得用于醫(yī)學診斷

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