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      葡萄糖6磷酸(6PG)測(cè)試盒

      簡要描述:

      葡萄糖6磷酸(6PG)測(cè)試盒是糖酵解和磷酸戊糖途徑的中間產(chǎn)物,廣泛存在于動(dòng)植物體和微生物中。在糖酵解的第一步反應(yīng)中,葡萄糖被己糖激酶催化生成葡萄糖-6-磷酸,然后通過磷酸葡萄糖異構(gòu)酶的催化形成果糖-6-磷酸,以繼續(xù)糖酵解的其它步驟;而在戊糖磷酸途徑中,葡萄糖-6-磷酸是其第一個(gè)底物,該過程也是生成NADPH的主要途徑。此外,葡萄糖-6-磷酸也能轉(zhuǎn)化形成糖原或淀粉而被儲(chǔ)存起來。

      更新時(shí)間:2024-09-03;廠商性質(zhì):經(jīng)銷商;覽量:945

      商品詳情:
      葡萄糖6磷酸(6PG)測(cè)試盒測(cè)定意義:

      6PG (Glucose-6-phosphate,葡萄糖-6-磷酸,又稱6-磷酸葡萄糖),是糖酵解和磷酸戊糖途徑的中間產(chǎn)物,廣泛存在于動(dòng)植物體和微生物中。在糖酵解的第一步反應(yīng)中,葡萄糖被己糖激酶催化生成葡萄糖-6-磷酸,然后通過磷酸葡萄糖異構(gòu)酶的催化形成果糖-6-磷酸,以繼續(xù)糖酵解的其它步驟;而在戊糖磷酸途徑中,葡萄糖-6-磷酸是其第一個(gè)底物,該過程也是生成NADPH的主要途徑。此外,葡萄糖-6-磷酸也能轉(zhuǎn)化形成糖原或淀粉而被儲(chǔ)存起來。

      貨號(hào)

      規(guī)格

      檢測(cè)方法

      YSH3378

      100管/48樣

      微量法

      YSH3378-1

      50管/24樣

      可見分光光度法

      測(cè)定原理:

      6-磷酸葡萄糖脫氫酶可催化6PG和NADP+生成6磷酸葡萄糖酸和NADPH,NADPH在1-mPMS的作用下使WST-8顯橙黃色,在450 nm下測(cè)定吸光值。

      需自備的儀器和用品:

      分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰、蒸餾水。
      樣品中AA提取:

      1.按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行室溫勻漿,然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中,蓋緊后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自來水冷卻后,8000g,,4℃離心10min,上清液置冰上待測(cè)。

      2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

      3.血清等液體:直接檢測(cè)。

      計(jì)算公式如下:

      1、血清(漿)LAP活力的計(jì)算:

      單位的定義:每mL血清(漿)每分鐘生成1 nmol的對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

      LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA

      2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計(jì)算:

      1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:

      單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

      LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

      2)按樣本鮮重計(jì)算:

      單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

      LAP(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W

      3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算:

      單位的定義:每1萬個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

      LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA

      V反總:反應(yīng)體系總體積,2×10-4 L;ε:對(duì)硝基苯胺摩爾消光系數(shù),9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.05 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時(shí)間,2 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;2000:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),2000萬。

      注意事項(xiàng):

      1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。

      2. 為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,需先取1-2個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn),如果測(cè)定的吸光值過高(高于2.5),用蒸餾水稀釋后再測(cè)定。

      3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無吸收峰,因此,570nm處測(cè)定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。

      4.檢出限為100μmol/L。

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      葡萄糖6磷酸(6PG)測(cè)試盒NADP磷酸酶(NADPase)測(cè)試盒50管/48樣 可見分光光度法

      6磷酸葡萄糖脫氫酶(G6PDH)/葡萄糖6磷酸脫氫酶測(cè)試盒100管/96樣 微量法

      6磷酸葡萄糖脫氫酶(G6PDH)/葡萄糖6磷酸脫氫酶測(cè)試盒50管/48樣 紫外分光光度法

      胞漿異檸檬酸脫氫酶(ICDHc)測(cè)試盒100管/96樣 微量法

      胞漿異檸檬酸脫氫酶(ICDHc)測(cè)試盒50管/48樣 紫外分光光度法

      NADP蘋果酸酶(NADPME)測(cè)試盒100管/96樣 微量法

      NADP蘋果酸酶(NADPME)測(cè)試盒50管/48樣 紫外分光光度法

      NAD蘋果酸酶(NADME)測(cè)試盒100管/96樣 微量法

      NAD蘋果酸酶(NADME)測(cè)試盒50管/48樣 紫外分光光度法



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